{"id":117,"date":"2021-07-05T11:15:00","date_gmt":"2021-07-05T09:15:00","guid":{"rendered":"http:\/\/blog.cell-lavie.com\/?p=117"},"modified":"2022-11-01T05:06:06","modified_gmt":"2022-11-01T05:06:06","slug":"identification-of-liver-cancer-stem-cell-stemness-markers-using-a-comparative-analysis-of-public-data-sets","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/cell-lavie.com\/zh\/identification-of-liver-cancer-stem-cell-stemness-markers-using-a-comparative-analysis-of-public-data-sets\/","title":{"rendered":"\u4f7f\u7528\u516c\u5171\u6570\u636e\u96c6\u7684\u6bd4\u8f83\u5206\u6790\u9274\u5b9a\u809d\u764c\u5e72\u7ec6\u80de\u5e72\u7ec6\u80de\u6807\u5fd7\u7269"},"content":{"rendered":"
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MINSEQE\uff08\u5173\u4e8e\u4e0b\u4e00\u4ee3\u6d4b\u5e8f\u5b9e\u9a8c\u7684\u6700\u5c11\u4fe1\u606f\uff09\u6570\u636e\u6807\u51c6\u3002\u8fd9\u786e\u4fdd\u5b58\u50a8\u7684\u6570\u636e\u88ab\u6b63\u786e\u683c\u5f0f\u5316\u4ee5\u4fc3\u8fdb\u6570\u636e\u5171\u4eab\u548c\u91cd\u65b0\u5206\u6790\u4ee5\u8fdb\u4e00\u6b65\u53d1\u73b0\u77e5\u8bc6\u3002 GEO \u4e2d\u5b58\u50a8\u7684\u6570\u636e\u5305\u62ec FASTQ 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\u7684\u9650\u5236\u300217<\/a><\/sup>\u7136\u800c\uff0c\u8003\u8651\u5230\u7814\u7a76\u4e2d\u6d4b\u5e8f\u3001\u7ec4\u88c5\u548c\u57fa\u56e0\u8c03\u7528\u65b9\u6cd5\u7684\u76f8\u4f3c\u6027\uff0c\u6211\u4eec\u9884\u8ba1\u57fa\u56e0\u8868\u8fbe\u8c31\u4e2d\u7684\u4efb\u4f55\u7cfb\u7edf\u6027\u95ee\u9898\u4e0d\u4f1a\u6765\u81ea\u4f7f\u7528\u65e0\u6cd5\u901a\u8fc7\u4e25\u683c\u5f52\u4e00\u5316\u89e3\u91ca\u7684\u57fa\u56e0\u8868\u8fbe\u6570\u636e\u8ba1\u6570\u77e9\u9635\uff0c\u8fd9\u5c06\u4f7f\u6211\u4eec\u7684\u7ed3\u679c\u5728\u8d28\u91cf\u4e0a\u4e0d\u540c\u4e8e\u4ece\u539f\u59cb\u6570\u636e\u5f00\u59cb\u7684\u91cd\u65b0\u5206\u6790\u3002<\/p>\n\n\n \u809d\u764c\u7814\u7a76\u5305\u62ec\u6765\u81ea 19 \u540d\u60a3\u8005\u7684 9946 \u4e2a\u5355\u7ec6\u80de RNA-seq \u56fe\u8c31\uff0c\u603b\u8ba1\u8d85\u8fc7 5600 \u4e07\u4e2a\u8bfb\u6570\u548c 42 \u4ebf\u4e2a\u78b1\u57fa\u5bf9 (GSE125449)\u30028<\/a><\/sup> \u80ce\u513f\u548c\u6210\u4eba\u809d\u810f\u7814\u7a76\u5305\u62ec 1467 \u4e2a\u5355\u7ec6\u80de RNA-seq \u56fe\u8c31\uff0c\u603b\u8ba1 2.83 \u4ebf\u4e2a\u8bfb\u6570\u548c 210 \u4ebf\u4e2a\u78b1\u57fa\u5bf9 (GSE130473)\u30029<\/a><\/sup> \u4e3a\u4e86\u89e3\u91ca\u4f4e\u8986\u76d6\u6837\u672c\u3001\u4f4e\u8986\u76d6\u57fa\u56e0\u548c\u6bcf\u4e2a\u5355\u7ec6\u80de\u6837\u672c\u7684\u8bfb\u53d6\u5dee\u5f02\u7684\u5f71\u54cd\uff0c\u6211\u4eec\u6267\u884c\u4e86\u4e25\u683c\u7684\u8fc7\u6ee4\u6b65\u9aa4\u548c\u5f52\u4e00\u5316\u4ee5\u89e3\u91ca\u6837\u672c\u7279\u5b9a\u7684\u5f71\u54cd\u3002\u4e3a\u4e86\u8fc7\u6ee4\u6389\u4f4e\u8986\u76d6\u7387\u6837\u672c\uff0c\u603b\u8bfb\u6570\u5c11\u4e8e 1000 \u7684\u6837\u672c\u88ab\u6392\u9664\u5728\u8fdb\u4e00\u6b65\u5206\u6790\u4e4b\u5916\u3002\u8fd9\u5bfc\u81f4\u63d0\u4ea4\u4e86 9505 \u4e2a\u809d\u764c\u6837\u672c\u548c 1260 \u4e2a\u5065\u5eb7\u809d\u810f\u6837\u672c\u8fdb\u884c\u5dee\u5f02\u8868\u8fbe\u5206\u6790\u3002<\/p>\n\n\n \u6b64\u5916\uff0c\u6240\u6709\u6837\u672c\u4e2d\u8bfb\u6570\u4e3a 0 \u7684\u57fa\u56e0\u90fd\u88ab\u6392\u9664\u5728\u5916\uff0c\u5bfc\u81f4\u5206\u6790\u4e2d\u5305\u542b\u6700\u540e\u4e00\u7ec4 42,684 \u4e2a\u57fa\u56e0\u3002\u9664\u4e86\u86cb\u767d\u8d28\u7f16\u7801\u57fa\u56e0\u5916\uff0c\u8be5\u57fa\u56e0\u96c6\u8fd8\u5305\u62ec\u5047\u57fa\u56e0\u548c lncRNA\u3002<\/p>\n\n\n \u4f7f\u7528edgeR\u8fdb\u884c\u5f52\u4e00\u5316\u548c\u5dee\u5f02\u8868\u8fbe\u5206\u679018<\/a><\/sup> R \u5305\uff0c\u4f7f\u7528\u6807\u51c6\u65b9\u6cd5\u3002\u9996\u5148\uff0c\u901a\u8fc7\u627e\u5230\u6587\u5e93\u5927\u5c0f\u7684\u6bd4\u4f8b\u56e0\u5b50\u4f7f\u6837\u672c\u4e4b\u95f4\u7684\u5bf9\u6570\u500d\u6570\u53d8\u5316\u6700\u5c0f\u5316\uff0c\u4ece\u800c\u5bf9\u6587\u5e93\u5927\u5c0f\u8fdb\u884c\u5f52\u4e00\u5316\u3002\u8fd9\u662f\u4f7f\u7528\u6bcf\u5bf9\u6837\u672c\u4e4b\u95f4\u7684 M \u503c (TMM) \u7684\u4fee\u526a\u5e73\u5747\u503c\u5b8c\u6210\u7684\uff0c19<\/a><\/sup> \u8ba1\u7b97\u6709\u6548\u5e93\u5927\u5c0f\u6bd4\u4f8b\u56e0\u5b50\u3002\u63a5\u4e0b\u6765\uff0cCox-Reid \u914d\u7f6e\u6587\u4ef6\u8c03\u6574\u4f3c\u7136 (CR) \u65b9\u6cd5\u7528\u4e8e\u901a\u8fc7\u5c06\u5e7f\u4e49\u7ebf\u6027\u6a21\u578b (GLM) \u4e0e\u8bbe\u8ba1\u77e9\u9635\u62df\u5408\u6765\u4f30\u8ba1\u5206\u6563\u5ea6\u300220<\/a><\/sup> \u6211\u4eec\u8ba1\u7b97\u4e86\u6240\u6709\u57fa\u56e0\u7684\u5171\u540c\u79bb\u6563\u5ea6\u3001\u53d6\u51b3\u4e8e\u57fa\u56e0\u4e30\u5ea6\u7684\u8d8b\u52bf\u79bb\u6563\u5ea6\u548c\u5355\u4e2a\u57fa\u56e0\u79bb\u6563\u5ea6\u3002\u5728\u4e3a\u6bcf\u4e2a\u57fa\u56e0\u62df\u5408\u8d1f\u4e8c\u9879\u5f0f GLM \u540e\uff0c\u4f7f\u7528\u51c6\u4f3c\u7136 F \u68c0\u9a8c\u8bc4\u4f30\u5dee\u5f02\u8868\u8fbe\uff0c21<\/a><\/sup>\u5b83\u8003\u8651\u4e86\u4f30\u8ba1\u6bcf\u4e2a\u57fa\u56e0\u7684\u79bb\u6563\u5ea6\u7684\u4e0d\u786e\u5b9a\u6027\uff0c\u56e0\u6b64\u63d0\u4f9b\u4e86\u66f4\u7a33\u5065\u548c\u53ef\u9760\u7684\u9519\u8bef\u7387\u63a7\u5236\u3002\u4e3a\u4e86\u89e3\u91ca\u4e24\u4e2a\u6570\u636e\u96c6\u4e4b\u95f4 mRNA \u68c0\u6d4b\u7684\u5dee\u5f02\uff0c\u6211\u4eec\u5728\u5dee\u5f02\u8868\u8fbe\u5206\u6790\u4e2d\u5b9e\u65bd\u4e86\u6279\u6b21\u6548\u5e94\u6821\u6b63\u3002\u7814\u7a76\u7c7b\u578b\u4f5c\u4e3a\u9644\u52a0\u53d8\u91cf\u5305\u542b\u5728\u8bbe\u8ba1\u77e9\u9635\u4e2d\u3002\u4f7f\u7528 Bonferroni \u591a\u91cd\u6d4b\u8bd5\u6821\u6b63\u8fdb\u4e00\u6b65\u63a7\u5236\u9519\u8bef\u53d1\u73b0\u7387\u3002<\/p>\n\n\n \u4f7f\u7528 DAVID 6.8 \u8fdb\u884c\u57fa\u56e0\u672c\u4f53\u8bba\u5206\u679022<\/a><\/sup> \u529f\u80fd\u6ce8\u91ca\u5de5\u5177\u3002\u5bf9 GO \u5206\u6790\u7ed3\u679c\u7684 p \u503c\u91c7\u7528\u4e86 Benjamini \u591a\u91cd\u68c0\u9a8c\u6821\u6b63\u3002\u5bf9\u4e09\u4e2a\u5b50\u672c\u4f53\u8fdb\u884c\u4e86\u5bcc\u96c6\u5206\u6790\uff1a\u751f\u7269\u8fc7\u7a0b\u3001\u5206\u5b50\u529f\u80fd\u548c\u7ec6\u80de\u6210\u5206\u3002\u5b8c\u6574\u7684\u667a\u4eba\u57fa\u56e0\u96c6\u88ab\u7528\u4f5c\u80cc\u666f\u57fa\u56e0\u96c6\u3002<\/p>\n\n\n \u4f7f\u7528 t \u5206\u5e03\u968f\u673a\u90bb\u57df\u5d4c\u5165 (t-SNE) \u5206\u6790\u5bf9\u6240\u6709 10,865 \u4e2a\u5355\u7ec6\u80de\u6837\u672c\u8fdb\u884c\u805a\u7c7b\u3002\u4f7f\u7528 EdgeR \u65b9\u6cd5\u5bf9\u8fc7\u6ee4\u540e\u7684\u57fa\u56e0\u8ba1\u6570\u6570\u636e\u8fdb\u884c\u5f52\u4e00\u5316\uff0c\u5e76\u5c06 log2 \u8f6c\u6362\u4e3a\u6bcf\u767e\u4e07\u8ba1\u6570 (CPM)\uff0c\u4ee5\u5728\u4e0d\u6539\u53d8\u6837\u672c\u57fa\u56e0\u7ec4\u6210\u7684\u60c5\u51b5\u4e0b\u89e3\u91ca\u6837\u672c\u4e4b\u95f4\u8bfb\u53d6\u8ba1\u6570\u7684\u5dee\u5f02\uff0c\u4ece\u800c\u5b9e\u73b0\u6837\u672c\u4e4b\u95f4\u66f4\u51c6\u786e\u7684\u6bd4\u8f83\u3002 t-SNE \u5206\u6790\u662f\u4f7f\u7528 Scikit-learn Python \u5305\u8fdb\u884c\u7684\u300223<\/a><\/sup> \u6570\u636e\u5728\u5d4c\u5165\u7a7a\u95f4\u7684\u4e8c\u7ef4\u4e2d\u53ef\u89c6\u5316\u3002\u4e0e\u6700\u8fd1\u90bb\u5c45\u7684\u6570\u91cf\u76f8\u5173\u7684\u56f0\u60d1\u5ea6\u503c\u88ab\u8bbe\u7f6e\u4e3a 30 \u4ee5\u8bf4\u660e\u5927\u6570\u636e\u96c6\u7684\u5927\u5c0f\u3002\u6211\u4eec\u91c7\u7528\u4e86 300 \u6b21\u4f18\u5316\u8fed\u4ee3\u6765\u5b8c\u5584\u805a\u7c7b\u5206\u6790\u3002\u63a7\u5236\u81ea\u7136\u7c07\u5728\u5d4c\u5165\u7a7a\u95f4\u4e2d\u7684\u7d27\u5bc6\u7a0b\u5ea6\u7684\u65e9\u671f\u5938\u5927\u56e0\u5b50\u4fdd\u6301\u5728\u9ed8\u8ba4\u503c 12.0\u3002\u540c\u6837\uff0c\u5b66\u4e60\u7387\u4fdd\u6301\u5728\u9ed8\u8ba4\u503c 200.0\u3002\u4f7f\u7528 matplotlib \u7ed8\u5236\u751f\u6210\u7684\u5d4c\u5165\u7a7a\u95f424<\/a><\/sup> \u548c seaborn25<\/a><\/sup> python \u4f7f\u7528\u6210\u5bf9\u7684\u8c03\u8272\u677f\u5c06\u5176\u6253\u5305\u4e3a\u6563\u70b9\u56fe\u3002<\/p>\n\n\n \u7bb1\u5f62\u56fe\u548c\u5c0f\u63d0\u7434\u56fe\u662f\u4f7f\u7528 ggplots2 \u751f\u6210\u7684\uff0c26<\/a><\/sup> \u4f7f\u7528 log2 CPM \u503c\u3002<\/p>\n\n\n \u4f7f\u7528\u5148\u524d\u53d1\u8868\u7684\u809d\u764c\u5355\u7ec6\u80de RNA-seq \u6570\u636e8<\/a><\/sup> \u4ee5\u53ca\u80ce\u513f\u548c\u6210\u4eba\u5065\u5eb7\u7684\u809d\u810f\uff0c9<\/a><\/sup> \u6211\u4eec\u91cd\u65b0\u5206\u6790\u4e86 42,684 \u4e2a\u57fa\u56e0\u4e2d\u7684 10,865 \u4e2a\u6837\u672c\u3002\u8fd9\u4e2a\u7ec4\u5408\u6570\u636e\u96c6\u4ee3\u8868\u4e86\u4e00\u4e2a\u5305\u542b\u8d85\u8fc7 252 \u4ebf\u4e2a\u78b1\u57fa\u5bf9\u7684\u6d4b\u5e8f\u6587\u5e93\u3002\u9274\u4e8e\u6765\u81ea\u4e24\u4e2a\u5b9e\u9a8c\u7684\u6570\u636e\u662f\u4f7f\u7528\u7565\u6709\u4e0d\u540c\u7684\u5e73\u53f0\u548c\u7a0b\u5e8f\u8fdb\u884c\u6d4b\u5e8f\u548c\u7ec4\u88c5\u7684\uff0c\u6211\u4eec\u6267\u884c\u4e86\u4e25\u683c\u7684\u8fc7\u6ee4\u548c\u6807\u51c6\u5316\u6b65\u9aa4\uff0c\u4ee5\u786e\u4fdd\u57fa\u56e0\u8868\u8fbe\u8c31\u5728\u6574\u4e2a\u7814\u7a76\u4e2d\u5177\u6709\u76f4\u63a5\u53ef\u6bd4\u6027\u3002\u8fd9\u4e00\u6b65\u5305\u62ec\u8fc7\u6ee4\u6389\u6240\u6709\u6837\u672c\u4e2d\u8bfb\u6570\u5c11\u4e8e 1000 \u7684\u7ec6\u80de\u3001\u8bfb\u6570\u4e3a\u96f6\u7684\u57fa\u56e0\u3002\u63a5\u4e0b\u6765\uff0c\u6211\u4eec\u4f7f\u7528 edgeR \u6267\u884c\u6587\u5e93\u5927\u5c0f\u5f52\u4e00\u5316\u56e0\u5b50\u5e76\u8ba1\u7b97\u6240\u6709\u57fa\u56e0\u7684\u5171\u540c\u79bb\u6563\u5ea6\u3001\u53d6\u51b3\u4e8e\u57fa\u56e0\u4e30\u5ea6\u7684\u8d8b\u52bf\u79bb\u6563\u5ea6\u548c\u5355\u4e2a\u57fa\u56e0\u79bb\u6563\u5ea618<\/a><\/sup> R\u5305\u3002\u7531\u4e8e cDNA \u6587\u5e93\u5236\u5907\u662f\u4f7f\u7528\u4e24\u79cd\u4e0d\u540c\u7684\u65b9\u6cd5\u8fdb\u884c\u7684\uff0cMa \u7b49\u4eba\u7684 10x Genomics Single Cell 3'8<\/a><\/sup>\u4e0e Segal \u7b49\u4eba\u7684 SmartSeq2 \u76f8\u6bd4\uff0c9<\/a><\/sup> \u6211\u4eec\u9996\u5148\u8bc1\u5b9e\u4e86\u6211\u4eec\u5bf9\u4e00\u7ec4\u7ba1\u5bb6\u57fa\u56e0\u7684\u6807\u51c6\u5316\u65b9\u6cd5\u7684\u6709\u6548\u6027\u300227<\/a><\/sup> \u6211\u4eec\u5bf9\u4e00\u7ec4\u53ef\u7528\u4f5c\u57fa\u56e0\u8868\u8fbe\u7814\u7a76\u53c2\u8003\u7684\u57fa\u56e0\u8868\u8fbe\u7684\u5206\u6790\u8868\u660e\uff0c\u809d\u764c\u4e4b\u95f4\u7684\u8868\u8fbe\u6ca1\u6709\u663e\u7740\u5dee\u5f028<\/a><\/sup> \u4ee5\u53ca\u80ce\u513f\u548c\u6210\u4eba\u7684\u5065\u5eb7\u809d\u810f9<\/a><\/sup> \u6570\u636e\u96c6\uff08\u56fe1<\/a>).\u5728\u4e3a\u9a8c\u8bc1\u8868\u8fbe\u6807\u51c6\u5316\u800c\u68c0\u67e5\u7684 7 \u4e2a\u7ba1\u5bb6\u57fa\u56e0\uff08MB\u3001FAM96B\u3001NDUFB4\u3001NOP10\u3001SNRPD2\u3001RPSA\u3001RPLP0\uff09\u4e2d\uff0cSNRPD2 \u663e\u793a\u51fa\u6700\u5927\u7684\u500d\u6570\u5dee\u5f02\uff0c\u5728 Ma \u7b49\u4eba\u7684\u6570\u636e\u96c6\u4e2d\u8868\u8fbe\u9ad8 0.20 \u500d\u3002\u9274\u4e8e\u6587\u5e93\u5236\u5907\u65b9\u6cd5\u7684\u5dee\u5f02\u53ef\u80fd\u5bfc\u81f4\u8868\u8fbe\u5dee\u5f02\uff0c\u8fd9\u4e9b\u7ed3\u679c\u901a\u8fc7\u5f3a\u8c03\u7814\u7a76\u4e2d\u8868\u8fbe\u6c34\u5e73\u7684\u76f8\u4f3c\u6027\uff0c\u8bc1\u5b9e\u4e86\u6211\u4eec\u6807\u51c6\u5316\u65b9\u6cd5\u7684\u6709\u6548\u6027\u3002<\/p>\n\n\n\u6750\u6599\u548c\u65b9\u6cd5<\/h2>\n\n\n
\u7ed3\u679c<\/h2>\n\n\n